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選擇一款適合梯度PCR儀應該注意什麼
釋出時間│▩:2021-02-04   點選次數│▩:824次
  PCR技術是一種用於放大擴增特定的DNA的分子生物學技術▩•◕,它可看作是生物體外的特殊DNA複製▩•◕,目前市場上常見的有│▩:普通PCR儀•╃↟、梯度PCR儀•╃↟、原位PCR儀•╃↟、熒光定量PCR儀(qPCR)以及數字PCR儀(dPCR)等◕╃↟╃。而使用多是梯度PCR儀和熒光定量PCR儀▩•◕,那麼怎樣選擇一款適合自己的梯度PCR儀呢•✘?
  1 準確的溫度控制系統
  對PCR儀來說▩•◕,溫度控制指標主要是指溫度的準確性•╃↟、均一性•╃↟、以及升降溫速度◕╃↟╃。
  溫度的準確性│▩:是指樣品孔溫度與設定溫度的一致性▩•◕,它直接關係到實驗的成敗◕╃↟╃。由於PCR是一個幾何級數擴增的過程▩•◕,不論是變性•╃↟、退火還是延伸都需要準確控制溫度▩•◕,對退火溫度而言溫控顯的尤為重要▩•◕,有時1°甚至0.5°的差異也能決定實驗的成功與失敗▩•◕,所謂差之毫釐▩•◕,謬之千里◕╃↟╃。因而對PCR擴增儀而言溫度控制就意味著質量◕╃↟╃。eg│▩:HealForce B960的溫度準確性嚴格控制在≤0.1℃◕╃↟╃。(國內大部分廠家僅要求≤0.2℃)
  溫度的均一性│▩:是指樣品孔間的溫度差異▩•◕,它關係到在不同樣品孔進行反應結果的一致性◕╃↟╃。有使用者發現用同樣的樣品▩•◕,同樣的PCR反應程式▩•◕,後的結果竟然差異非常明顯▩•◕,或許就是因為不同位置的溫度不均勻所致◕╃↟╃。同時位置邊緣效應對PCR實驗可重複性影響非常明顯◕╃↟╃。
  升降溫速率│▩:更快的升降溫速度▩•◕,可以縮短反應進行的時間▩•◕,而且縮短了可能的非特異性結合•╃↟、反應的時間▩•◕,能提高PCR反應的特異性◕╃↟╃。
  2  儀器的功能性和人性化設計
  越友好的操作介面•╃↟、完善的功能以及人性化的設計更能吸引使用者◕╃↟╃。(熱蓋•╃↟、樣品座•╃↟、軟體)
  熱蓋│▩:現在的PCR儀一般均配備熱蓋▩•◕,熱蓋溫度設為105℃▩•◕,使樣品管頂部的溫度達到105℃左右▩•◕,蒸發的反應液就不會產生凝集在管蓋上而改變反應體積▩•◕,這樣使用者就無需再向反應管內加石蠟油▩•◕,直接減少後繼反應的麻煩◕╃↟╃。HealForce熱蓋溫度範圍為│▩:20-110℃◕╃↟╃。
  樣品座│▩:PCR反應多在0.2或者0.5的管子中進行▩•◕,多數PCR儀也配備了不同的可更換樣品槽適配不同的樣品管◕╃↟╃。HealForce PCR儀一個槽內帶有0.2和0.5兩種不同樣品孔▩•◕,不需更換基座就可以分別使用兩種不同的反應管▩•◕,或者96孔板▩•◕,避免了換基座的麻煩◕╃↟╃。
  軟體│▩:新的PCR儀都比較注重程式編寫的簡易性◕╃↟╃。大螢幕▩•◕,顯示實時資訊▩•◕,倒計時▩•◕,記憶儲存多個程式•╃↟、自動斷電保護等都有助於實驗室中的複雜環境使用◕╃↟╃。HealForce T960和B960 PCR儀基於Windows作業系統▩•◕,配備了PC端軟體▩•◕,可以實現智慧化操控◕╃↟╃。
 
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